PDE-5阻害薬の偽造医薬品の比較溶解研究 E. Deconinck S. Andriessens JL避難小屋P. Courselle JO デビール。 食品、医薬品および消費者安全、セクション医薬品、公衆衛生（WIV-ISP）の科学研究所、J Wytmansstraat 14、B-1050ブリュッセル、ベルギーの課 受信した8月6日、2013年には15に1月2014年に認められた2014年3月6日2014年3月13日利用可能なオンラインを改訂しました。 偽造医薬品は両方開発し、先進国に成長している問題です。 一般に、これらの薬剤の評価は、識別及び活性成分の投与量に限定されています。 この研究では、インビトロ溶解試験においてPDE-5阻害薬（クエン酸シルデナフィルおよびタダラフィル）を含む偽造医薬品の二組で行いました。 溶解プロファイルは、統計的にF 2 - methodおよびコクランの検定を用いて、各時点での比較を用いて、純正品のものと比較しました。 結果は偽造と純正品との間に低等価だけでなく、偽造製品の異なる時点での平均溶解値付近高い変動を示しました。 2 - methodコクランテストFインビトロ溶解で偽造PDE-5阻害剤 1はじめに 今日では、世界中の医療市場の約10-15％が偽造製品で覆われていると推定されます。 しかし、偽造医薬品の最も高い優先順位は、それが販売されている医薬品の約30％が偽造されていると推定されている弱い規制システム、と発展途上国で見つけることができます。 いくつかの国では、この比率はさらに、販売上の薬剤の60％と高くすることができます。 先進国での問題は、影響を受けた医薬品市場の1％未満とあまり深刻である[1]。 [2]、[3]。 先進国と途上国の間で、違いも遭遇した偽造医薬品の種類に存在します。 発展途上国では救命薬などの抗生物質、抗マラリア製品、HIV阻害剤、のような多くの場合、偽造されている[4]。 [5]。 [6]、[7]。 先進国にいる間、彼らは主に、PDE-5阻害薬および食欲減退などのライフスタイルの薬[8]です。 しかし、抗悪性腫瘍を偽造し、心血管薬はまた西部の世界[9]で検出されたことを言及する必要があります。 このような偽造医薬品とマラリア、肺炎、髄膜炎、およびAIDSなど高い未処理の死亡率を伴う疾患の治療は、死亡率および罹患率の増加だけでなく、微生物抵抗性の発症の増加リスクだけでなく、につながります。 後者は、偽造医薬品は、多くの場合、準治療用量での有効成分が含まれているという事実によるものです。 この場合、でも本物の薬は、[10]、非効率的になることができます。 偽造ライフスタイルの薬物について、リスクは、最大一日摂取量と間違っを超える存在しないか、不十分な情報につきましては、有毒な不純物またはコンポーネント、予想外の有効成分や不正およびテストされていない類似体またはデザイナー分子、誤った投与量の存在下でよりに位置しています 薬物の使用[8]。 「意図的と不正同一性および/またはソースに関してmislabelledされる1：WHOが[11]のように、偽造薬を定義します。 偽造は不十分な有効成分または偽のパッケージングで、有効成分なしで、正しい食材を使用したり、間違った食材を使った製品を含むことができ、ブランドジェネリック品と偽造品の両方に適用することができます。「次も規格外の薬を定義し、この定義に 定義では、「国の基準によって彼らのために設定します。品質規格を満たしていない国立医療規制当局によって承認メーカーによって生産本物の医学」、薬の後者のグループがすべきのように（また、仕様（OOS）製品の外と呼ばれます） 市場には存在しません。 その場合、問題は、正当なサプライチェーンの管理で発生したか、不謹慎な活動や破壊されている必要があり、これらの医薬品の再販[10]が行われています。 文献に多数の論文は、いくつかの分析技術は、偽造医薬品の検出および特徴付けのために使用されている見ることができる[1]。 これらの論文は、しかしながら、偽造の検出、活性成分の同定、これらの活性成分の投薬量、不純物のいくつかの例で存在に自分自身を制限します。 有効性が、毒性及び公衆衛生のためのリスクは、他のパラメータによって影響を受けることができ、それは、市場での偽造医薬品のほとんどはアカウントに優れた製造手順の原則を取ることなく、その製造されていることを心に留めておくべきです 彼らは品質管理のいずれかの種類なしで販売されています。 これは、製品が正しい活性成分とし、適切な投与量で見られる場合でも、完成した製品の品質は、製品の有効性/二次的な効果に影響を与えることができるという事実につながる可能性があります。 これらの影響は、錠剤を圧縮するために使用される圧力のような製造プロセス、および完成品の保管及び輸送条件に、純正品のものとは異なることができます使用される賦形剤の種類や性質に起因することができます 。 論文のみの限られた数はすでに、本物の一般的な偽造医薬品を用いたin vitro溶出試験で行うことで、この問題に対処しています。 これらの研究のほとんどは、発展途上国の市場に抗マラリア製品に対して行われた[4]。 [12]。 [13]と[14]。 Gaudianoら。 [4]コンゴ、ブルンジとアンゴラ非公式市場で偽造や規格外抗マラリア薬の品質分析を行いました。 それらは、サンプルの約50％がブランド製品[4]と比較して生物学的利用能および生物学的同等性に影響を及ぼす可能性があり、サブ標準技術的特性及び非常に低い溶解プロフィールを示したことを見出しました。 この論文PDE-5阻害剤を含有する偽造及び模造サンプルの溶解試験では、インビトロ溶解試験に用いて行きました。 バイアグラ®やシアリス®の本物、偽物や模造サンプルが溶解プロフィールを得るために分析しました。 これらのプロファイルは、統計学的に比較しました。 我々の知る限り、そのような研究は、欧州市場で見つかった偽造品に実施される初めてです。 結果として、偽造品の溶解プロファイルについての知識は、これらの製品のリスク評価において重要です。 このリスクアセスメントは、両方の最も危険な製品にカスタムキャンペーンの焦点を合わせるために使用することができ、そうでなければ、これらの偽造品に対する需要を低下させるためには、科学的データに基づいて問題の公開を感作します。 2材料と方法 2.1サンプル すべての偽造や模造サンプルはベルギー（FAMHP）医薬品およびヘルスケア製品のための連邦機関によって寄贈されました。 バイアグラ®の本物のサンプルが親切にファイザーのSA / NV（Puurs、ベルギー）によって提供されました。 イーライリリーのSA / NV（ベネルクス）が親切にシアリス®の本物のサンプルを提供しました。 2.2化学物質および試薬 クエン酸シルデナフィルおよびタダラフィルのための参照標準は、親切に、それぞれ、ファイザーのSA / NV（Puurs、ベルギー）とイーライリリーのSA / NV（ベネルクス）によって寄贈されました。 アセトニトリルHPLC等級はBiosolve（Valkenswaard、オランダ）から購入しました。 ギ酸99％とドデシル硫酸ナトリウムは、VWRインターナショナル（ルーベン、ベルギー）から購入しました。 アンモニア溶液25％（m / m）の、および塩素酸36％（M / M）は、Merck（ダルムシュタット、ドイツ）から購入しました。 2.3インストゥルメンタル条件 2.3.1解散 溶解試験は、Sotax AT6とSotax AT7スマート溶解装置（Sotax、Alschwil、スイス）を用いて行きました。 ヨーロッパ薬局方[15]により記載されたように解散は、以下の試験装置2（パドル）を行いました。 回転速度は50 rpmで、および37.0±0.5°Cでの血管の温度に設定しました。 0.01 MのHClの900mLのタダラフィルを含むサンプルに使用しながら、シルデナフィル含有試料0.5％ドデシル硫酸ナトリウム（SDS）を1 Lのために、溶解媒体として使用しました。 溶解媒体の2ミリリットルの試験を開始した後、それぞれ、5、10、15、30、45、60および120分で採取しました。 サンプリングされた溶解媒体の量が交換されていませんでした。 媒体の損失は、溶解プロフィール[16]の計算中に修正されました。 、利用可能なサンプルの限られた量のために、すべてのサンプルは、トリプリケートで試験しました。 錠剤およびゲルは単に溶解試験の開始時の溶解媒体に加えました。 カプセルおよび柔らかいキャップは、特に装置2との溶解試験のために設計され、金属製の足場内に配置され、試験の開始時に溶解培地に添加しました。 2.3.2 HPLC サンプルおよび溶解媒体の両方で数量化は、ウォーターズ2695アライアンス®クロマトグラフィーシステム（ウォーターズ社、ミルフォード、米国）上で実施しました。 システムは、四級ポンプ、温度制御オートサンプラーおよびWaters®2998ダイオードアレイ検出器（DAD）に連結されたカラムヒーター、から成っていました。 出力信号を監視し、ウォーターズのEmpower®2ソフトウェアを用いて処理しました。 分析は、有機修飾剤として水相とアセトニトリルのよう10mMのギ酸アンモニウム緩衝液pH 3.5で勾配を用いてウォーターズエクステラRP18（4.6ミリメートル×150ミリメートル、5μm）をクロマトグラフィーカラム上で行いました。 勾配は、70％の緩衝液で開始しました。 勾配が5分で65％のバッファに到達し、3分で55％まで、さらに行ってきました。 その後、20％のバッファの高原は、1分間に達し、初期条件に戻る前に2分間保持しました。 流量を1mL /分でした。 カラム温度は30℃に設定しました。 試料温度を15°Cに設定し、検出は、254nmの波長で行いました。 タダラフィルを含むサンプルのために、20μL[17]に設定しながら、クエン酸シルデナフィルを含むサンプルについての注入量は5μLとしました。 標準液およびサンプルの2.4準備 1.0 mg / mlの0.2 mg / mlでのクエン酸シルデナフィルおよびタダラフィルのストック溶液を、それぞれ、溶媒としてアセトニトリル/水（50/50）を用いて調製しました。 クエン酸シルデナフィル、25、50、100及び150μgの/ mLでの較正標準をアセトニトリル/水（50/50）を用いて原液の希釈によって調製しました。 5、10、20および40 / mlのタダラフィルの較正標準は、同じ手順を用いて調製しました。 解散前の試料のそれぞれにおけるクエン酸シルデナフィル及びタダラフィルの投与量を測定しました。 これは、我々の自由にサンプルの限られた量を、ある用量単位で行いました。 投与単位はアセトニトリル/水50/50 100mLに持ち込み、少なくとも30分間撹拌しました。 得られた溶液は、その後、同じ溶媒で10倍に希釈し、0.2μmのポリテトラフルオロエチレンシリンジフィルター（∅13 mmの、VWRインターナショナル）を介して濾過しました。 各試料溶液を二回注入しました。 濃度は、バック調製した標準を用いて得られた検量線を用いて計算し、最小二乗回帰を用いて計算しました。 2.5計算 すべての計算は、Microsoft Windows®用のエクセル®2010年に実施されました。 米国薬局方[18]によって推奨されるような溶解プロフィールをF 2 - methodを用いて比較しました。 [19]と[20]。 各時点での溶解のパーセンテージは、異分散データ[21]の場合に使用することができる適合のt検定であるコクラン検定を用いて比較しました。 3結果と考察 有効成分の3.1定量 バイアグラ®とシアリス®の両方のための十八偽造や模造サンプルはそれらの溶解について試験しました。 各サンプルについてシルデナフィルおよびタダラフィルの内容は、1つの用量単位で測定しました。 これは、利用可能なサンプルあたり投与単位の限られた数に行われました。 表1は、溶出試験に使用されるシルデナフィルを含有する18サンプルのセットを示します。 パッケージに基づいて、ブリスターおよび/またはタブレット上のマークは、すべてのサンプルは、投与単位あたりシルデナフィル100mgを含有すべきです。 しかしながら、一つの投与単位のコンテンツ決意は、コンテンツが51.57および投薬単位当たり114.33 mgの間で変化することを、図6のサンプル（サンプル1、3、13、14、15及び18）95-105の品質基準を満たさなかったことを示し 医薬品の料理のためのセットのような活性成分の％。 これらの結果は、投与量は一つの投与単位で測定したので、注意して処理し、含量均一性のために、欧州薬局方基準を以下すべきであり、個々の投薬単位は、75％であり、製造業者が主張する用量の125％の間で外れることができる[15]。 これは、二つのサンプル（サンプル1〜13）は、コンテンツの品質基準を満たしていないことを意味します。 その生薬形態および1投与単位で測定し、その内容とバイアグラの表1偽造サンプル®。